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基因合成需要客户提供质粒。
可以,就是基因合成,只需要客户提供抗体的重链和轻链序列就可以。
我们目前的抗体表达载体是鼠源和人源,可以合成goat,chicken或者sheep的全长抗体序列装到pTT5里进行表达。
大概需要1-2ug即可。
有慢病毒载体:pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP和pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro.可以问下客户的研究目的. 如果客户做蛋白的建议还是不要建议这两个载体。
转染细胞一般用flag检测表达情况。如果有标签可以做WB来鉴定是否表达。用荧光载体或QPCR检测是否转染细胞。若质粒没有加荧光可以用QPCR检测。
1、引物 更换引物尝试,设置阳性对照(其他同载体的质粒)和阴性对照(空载体)看是否引物问题。 2、PCR扩增体系 一般问题不大,可以看下退火温度等信息。 3、抗性是否加错,抗性浓度是否正常。